ChromaLinkTM?Biotin Antibody Labeling Kit具有標(biāo)記抗體所有必需的試劑，用于任何含賴氨酸蛋白質(zhì)的生物素化標(biāo)記。該試劑盒提供了足夠的材料在大約2小時(shí)內(nèi)給5種抗體標(biāo)記生物素化和純化。每個蛋白質(zhì)標(biāo)記反應(yīng)的規(guī)模由研究者選擇，每個反應(yīng)可以從少至25ug到多至1mg蛋白質(zhì)。

The ChromaLinkTM?Biotin labeling過程是基于一種被稱為色素連接蛋白生物素的可追蹤紫外線的專利接頭(圖1)。該方法基于一種先進(jìn)的蛋白質(zhì)生物素化試劑，該試劑含有芳香族的N-羥基琥珀酰亞胺酯官能團(tuán)(a)，該官能團(tuán)有效地修飾磷酸鹽緩沖體系中的蛋白質(zhì)賴氨酸殘基。接頭具有嵌入的雙芳基腙結(jié)構(gòu)(b)，其形成化合物的紫外線可追蹤發(fā)色團(tuán)。這種獨(dú)特發(fā)色團(tuán)的可追蹤性質(zhì)使得附著在蛋白質(zhì)上的生物素(c)能夠無損定量。這三種不同的化學(xué)元素通過長鏈PEG3間隔物(d)連接在一起，這種間隔物保持鏈霉親和素/生物素的親和力，同時(shí)保持抗體的溶解性。

圖1. ChromaLink? Biotin C38H50N8O10S（MW: 810.92）的結(jié)構(gòu)

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ChromaLinkTM?Biotin Antibody Labeling Kit為蛋白質(zhì)的定量生物素化提供了一個更簡單的解決方案，分子量在20-200 kDa范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)很容易用ChromaLinkTM?Biotin進(jìn)行生物素化。使用ChromaLinkTM?Biotin消除了進(jìn)行繁瑣和間接生物素結(jié)合測定的需要，例如耗時(shí)的HABA或熒光報(bào)告蛋白測定法，用于測定生物素的摻入程度。相反，在標(biāo)記后，生物素摩爾取代比直接通過簡單的紫外分光光度掃描(220-420nm)或兩種波長的單點(diǎn)測量(A280/A354)來測量簡便。

圖2.?ChromaLinkTM?Biotin Antibody Labeling Kit標(biāo)記的過程。

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