PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基是化學成分明確的完全培養(yǎng)基,不含血清和酚紅,專用于人類胚胎干細胞(hESCs)和誘導多能干細胞(hiPSCs)的無飼養(yǎng)層維持培養(yǎng)和擴增(需以BD?Matrigel?作為表面包被基質)。該培養(yǎng)基可保持hESCs和hiPSCs的未分化、多能狀態(tài)(SSEA4+/Oct4+),流式細胞儀分析顯示自發(fā)分化的細胞比例低于15%。該培養(yǎng)基的獨特配方中含有FGF2(堿性成纖維細胞生長因子)等生長因子,但不含市場上大多數其他品牌胚胎干細胞培養(yǎng)基中存在的胰島素。PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基由美國PeproTech公司和美國Rutgers(羅格斯)大學干細胞培訓中心合作設計與研發(fā),含一瓶100mL或500mL基礎培養(yǎng)基和一管單獨的重組生長因子凍干粉。
PeproTech 胚胎干細胞培養(yǎng)基(PeproGrow-hESC)的競爭性優(yōu)勢
H1人類胚胎干細胞的生長H1人類胚胎干細胞(hESC)在PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)Dispase酶消化傳代,并用含2u?MY-27632(Rho激酶抑制劑)的PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基鋪板于包被有BD Matrigel?的6孔板中。每天換液,并分別在傳代后24,48,和72小時拍照。該hESC經慢病毒(Lentivirus)感染改造,使得其含有Oct4啟動子驅動表達的turboGFP熒光蛋白基因,因此圖中綠色熒光為Oct4啟動子發(fā)揮活性所致,提示細胞保持著多能性。與競爭公司的胚胎干細胞培養(yǎng)基相似,PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基可很好地維持干細胞的多能狀態(tài),但PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞鋪板效果更好,可更快地融合。?
人類胚胎干細胞(hESCs)在PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞形態(tài)?
PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基中含有獨特細胞因子組合,起初可能會改變細胞或克隆的外觀,使它們看起來更為平整和形態(tài)多樣。但是隨著細胞密度的增大和經過數次傳代后,這種形態(tài)改變越發(fā)不明顯。干細胞將形成標準的致密圓形克?。ㄗ髨D),細胞形態(tài)正常,并具有較大的細胞核和較少的細胞質(右圖)。?
PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)誘導多功能干細胞(hiPSCs)的免疫染色結果?
細胞接種于24孔板,多聚甲醛固定、DAPI和圖中標示的抗體熒光染色抗體染色顯示出細胞的多能性。
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?參數 |
?細菌檢測 | ?陰性 |
?滲透壓 | ?340-350 mOsm(毫滲) |
?pH值 | ?7.35-7.40 |
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?PeproGrow-hESC胚胎干細胞培養(yǎng)液 |
?PeproGrow-hESC | | ?500mL | ?2800元 |
?PeproGrow-hESC | | ?100mL | ?1120元 |
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