InvivoGen提供了用于炎癥小體研究的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)工具，并不斷擴(kuò)充這一連串的產(chǎn)品系列。人源單核細(xì)胞系THP-1由于表達(dá)高水平的NLRP3、ASC和pro-caspase-1而被廣泛用于炎癥小體的研究。為了幫助您評(píng)估特定炎癥小體在經(jīng)典和非經(jīng)典炎癥反應(yīng)中的作用，我們?cè)O(shè)計(jì)了THP1或RAW264.7衍生細(xì)胞，它們敲除（KO）或敲低了（def）NLRP3、ASC、 CASP-1、CASP-4、CASP-11、NLRC4和GSDMD的基因表達(dá)。此外，這些細(xì)胞可作為對(duì)照，應(yīng)用于篩選新療法上。這些細(xì)胞系的功能驗(yàn)證均使用了HEK-BlueTM IL-1β細(xì)胞來(lái)檢測(cè)生物活性 IL-1β 的釋放（可咨詢欣博盛生物索要相關(guān)資料）。
監(jiān)測(cè)NLRP3依賴性應(yīng)答
THP1-KO-NLRP3 Cells
THP1-KO-NLRP3細(xì)胞敲除了NLRP3基因的N端區(qū)域，此基因敲除通過(guò)了DNA測(cè)序、PCR和Western blot驗(yàn)證。這些細(xì)胞表達(dá)一個(gè)非活性NLRP3的C末端片段，因此，它們與尼日利亞霉素或氫氧化鋁孵育后，會(huì)使IL-1β的分泌和細(xì)胞焦亡的發(fā)生被阻斷。值得注意的是，在Poly(dA:dT)或大腸桿菌外膜囊泡（OMVs）的刺激下，IL-1β的分泌在cGAS-STING-NLRP3或CASP-4/5炎癥小體激活時(shí)受到嚴(yán)重?fù)p害。因此，THP1-KO-NLRP3細(xì)胞可以用來(lái)區(qū)分NLRP3和其他炎癥小體傳感器的激活。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| THP1-KO-NLRP3 Cells | 3-7 x 10(6) cells | thp-konlrp3z |
| THP1-Null2 Cells | 3-7 x 10(6) cells | thp-nullz |
NLRP3：一個(gè)具吸引力的藥物靶點(diǎn)
NLRP3的活化可由多種刺激物介導(dǎo)，然而這種拮抗感染的進(jìn)化優(yōu)勢(shì)也可以是一種負(fù)擔(dān)。事實(shí)上，NLRP3與多種疾病有關(guān)，如2型糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、阿爾茨海默病和癌癥，因此NLRP3成為了具吸引力的藥物研發(fā)靶點(diǎn) [34, 35] 。
監(jiān)測(cè)NLRC4依賴性應(yīng)答
THP1-KO-NLRC4 Cells& RAW-ASC KO-NLRC4 Cells
THP1-KO-NLRC4 細(xì)胞敲除NLRC4的核苷酸結(jié)合域（NDB），使得NLRC4蛋白無(wú)法為炎癥小體的組裝而聚合（見(jiàn)第9頁(yè)）。RAW-ASC KO-NLRC4細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)鼠源ASC基因（一般在
RAW264.7細(xì)胞中缺失[36]），并經(jīng)DNA測(cè)序、PCR和Western blot證實(shí)敲除了雙等位基因NLRC4。THP1-KO-NLRC4和RAWASC-KO-NLRC4細(xì)胞在分別與Needle-Tox和Rod-Tox孵育時(shí)，顯示了受損的IL-1β分泌和細(xì)胞焦亡。重要的是，兩種KO細(xì)胞系對(duì)其他炎癥誘導(dǎo)劑（如Poly(dA:dT)）的應(yīng)答僅受到輕微影響。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| THP1-KO-NLRC4 Cells | 3-7 x 10（6） cells | thp-konlrc4z |
| RAW-ASC KO-NLRC4 Cells | 3-7 x 10（6） cells | raw-konlrc4 |
監(jiān)測(cè)ASC依賴性應(yīng)答
THP1-KO-ASC Cells
THP1-KO-ASC細(xì)胞經(jīng)DNA測(cè)序、PCR和Western blot證實(shí)，具有ASC基因的雙等位基因KO。這些細(xì)胞可以用來(lái)確定炎癥小體是否需要ASC來(lái)激活。值得注意的是，它們對(duì)NLRP3或CASP-4誘導(dǎo)劑的應(yīng)答嚴(yán)重受損。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| THP1-KO-ASC Cells | 3-7 x 10（6） cells | thp-koascz |
監(jiān)測(cè)CASP-1依賴性應(yīng)答
THP1-defCASP1 Cells
THP1-defCASP1細(xì)胞比其THP1-Null母細(xì)胞系表達(dá)約少7倍的caspase-1，強(qiáng)烈欠缺capase-1活性。這細(xì)胞系有助于篩選新型炎癥小體誘導(dǎo)劑。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| THP1-defCASP1 Cells | 3-7 x 10(6) cells | thp-dcasp1 |
| THP1-Null Cells | 3-7 x 10(6) cells | thp-null |
研究特定炎癥小體的工具
單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞是處于免疫防御前線的天然細(xì)胞，因此是研究炎癥小體信號(hào)最廣泛使用的細(xì)胞類型。
骨髓源性巨噬細(xì)胞（BMDMs）是經(jīng)過(guò)體外分化的原代細(xì)胞。
THP-1 細(xì)胞系是一種表達(dá)高水平NLRP3、ASC和pro-caspase-1的人源單核細(xì)胞系 [37] 。
敲除（KO）和敲低（KD）用于研究特定的基因功能，以及它們是否能被另一個(gè)基因所補(bǔ)償。
化學(xué)抑制劑可以輔助KO/KD細(xì)胞系工具。這些小分子雖然具阻斷蛋白的功能，但仍可以允許蛋白組裝成大分子復(fù)合物。
監(jiān)測(cè)CASP-4依賴性應(yīng)答
THP1-KO-CASP4 Cells
THP1-KO-CASP4細(xì)胞經(jīng)DNA測(cè)序、PCR和Western blot驗(yàn)證，具有CASP4基因的雙等位基因KO。這些細(xì)胞與預(yù)期中一樣，對(duì)NLRP3誘導(dǎo)劑（如尼日利亞霉素）的應(yīng)答不受影響，而對(duì)CASP-4誘導(dǎo)劑（如轉(zhuǎn)染的LPS）的應(yīng)答則受到阻礙。盡管CASP4基因已完全敲除，但可能由于被CASP-5部分激活，這些細(xì)胞在轉(zhuǎn)染LPS后仍分泌可檢測(cè)水平的IL-1β。
InvivoGen還提供從RAW-ASC細(xì)胞系產(chǎn)生的 RAW-ASC KO-CASP11細(xì)胞。這些細(xì)胞具有CASP-11基因的雙等位基因KO，它們對(duì)非經(jīng)典炎癥小體誘導(dǎo)物（如轉(zhuǎn)染的LPS或大腸桿菌OMVs）的應(yīng)答受損。
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| THP1-KO-CASP4 Cells | 3-7 x 10(6) cells | thp-kocasp4z |
| RAW-ASC KO-CASP11 Cells | 3-7 x 10(6) cells | raw-kocasp11 |
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