Enzo Life Sciences公司的EFLUXX-ID?多藥耐藥性分析試劑盒可實現(xiàn)對三個臨床相關(guān)的ABC轉(zhuǎn)運蛋白MDR1 (p-glycoprotein), MRP1/2和BCRP的功能檢測。試劑盒采用疏水性的非熒光化合物，很容易穿透細胞膜，細胞內(nèi)脂酶將其水解為親水性的熒光染料。除非ABC轉(zhuǎn)運蛋白通過主動運輸將其泵出胞外，否則產(chǎn)生的熒光染料將包裹在細胞內(nèi)。因此如果細胞對藥物有抗性作用，熒光強度就會減弱。EFLUXX-ID?多藥耐藥性分析試劑盒是目前少有可同時監(jiān)測三種主要的ABC轉(zhuǎn)運蛋白并能夠分析單泵活性的試劑盒。
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EFLUXX-ID?多藥耐藥性染料與其他熒光染料的兼容性
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產(chǎn)品信息
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
ENZ-51029-K100 | EFLUXX-ID??Green multidrug resistance assay kit | 1*1Kit(100 assays For flow cytometry) |
ENZ-51030-K100 | EFLUXX-ID??Gold multidrug resistance assay kit | 1*1Kit(100 assays For flow cytometry) |
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產(chǎn)品特點
●?可檢測與3種ABC轉(zhuǎn)運蛋白活性相關(guān)的多藥耐藥性
●?通過單一專有染料定量檢測活細胞中MDR活性，并以MDR活性因子（MAF）表征
●?試劑盒內(nèi)含有已知的MDR1、MRP1/2和BCRP特異性抑制劑
●?操作簡單，無需洗滌，1h?內(nèi)可獲得結(jié)果
●?可檢測Calcein AM無法檢測到的BCRP蛋白活性
●?有綠色和金色兩種熒光染料可供選擇
●?兩種染料均可與表達GFP的細胞系或其他CELLESTIAL?染料同時使用
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實例分析
●?EFLUXX-ID??Green 490/514nm ex/em和EFLUXX-ID??Gold 530/570nm ex/em試劑的光譜特性可與其他常見熒光染料進行多重檢測。
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●?使用EFLUXX-ID?Green和EFLUXX-ID?Gold染料在CHO K1細胞中評估已知抑制劑對ABC轉(zhuǎn)運蛋白活性的分析
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將細胞與試劑盒中含有的MDR通用抑制劑（最左列）或轉(zhuǎn)運蛋白特異性抑制劑在37°C下孵育5 min。隨后在37°C下用指定的染料染色細胞30 min，并立即通過流式細胞術(shù)進行分析。所用抑制劑：5 μM Cyclosporin A（MDR通用抑制劑）、20 μM Verapamil（P-gp特異性抑制劑）、0.05 mM MK-571（MRP特異性抑制劑）、0.05 mM Novobiocin（BCRP特異性抑制劑）。
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●?三種主要ABC轉(zhuǎn)運蛋白的活性分析
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?使用EFLUXX-ID?Green（上）、Gold（中）或Calcein AM（下）染料，通過流式細胞術(shù)評估CHO K1細胞中ABC轉(zhuǎn)運蛋白的活性。與未處理的細胞相比，用ABC轉(zhuǎn)運蛋白特異性抑制劑（圖中陰影部分）處理可誘導(dǎo)染料在細胞內(nèi)的滯留（圖中實線部分）。平均熒光強度（MFI）的差異表明了對應(yīng)蛋白的活性，以多藥耐藥性活性因子值（MAF）表征多藥耐藥性。結(jié)果表明EFLUXX-ID?染料對抑制劑具有良好的特異性，而Calcein AM染料（常用的MDR檢測探針）無法檢測BCRP活性。
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部分產(chǎn)品文獻引用
1.?Overexpression of P-glycoprotein and MRP-1 are pharmacogenomic biomarkers to determine steroid resistant phenotype in childhood idiopathic nephrotic syndrome: P. Narayan, et al.; Pharmacogenomics J. 21, 566 (2021)
2.?Targeting poor proteasomal function with radioiodine eliminates CT26 colon cancer stem cells resistant to bortezomib therapy: J. H. Lee, et al.; Sci. Rep. 10, 14308 (2020)
3.?Class III β-Tubulin Overexpression Induces Chemoresistance to Eribulin in a Leiomyosarcoma Cell Line: K. Yahiro, et al.; Anal. Cell. Pathol. (Amst.) 2018, 8987568 (2018), Application(s): Flow cytometry. MDR1 activity in human leiomysarcoma cell line SK-LMS-1
4.?Soluble uric acid increases PDZK1 and ABCG2 expression in human intestinal cell lines via the TLR4-NLRP3 inflammasome and PI3K/Akt signaling pathway: M. Chen, et al.; Arthritis Res. Ther. 20, 20 (2018)
5.?ABCB1 and ABCG2 drug transporters are differentially expressed in non-small cell lung cancers (NSCLC) and expression is modified by cisplatin treatment via altered Wnt signaling: M. Vesel, et al.; Respir. Res. 18, 52 (2017)
6. Expression and activity of multidrug resistance proteins in mature endothelial cells and their precursors: A challenging correlation: A. Krawczenko, et al.; PLoS One 12, e0172371 (2017), Application(s): Comparison of different MDR detection methods in endothelial non-cancerous cells
7. Identification of volasertib-resistant mechanism and evaluation of combination effects with volasertib and other agents on acute myeloid leukemia: Y. Adachi, et al.; Oncotarget 8, 78452 (2017), Application(s): Flow Cytometry; acute myeloid leukemia
8. Isomahanine induces endoplasmic reticulum stress and simultaneously triggers p38 MAPK-mediated apoptosis and autophagy in multidrug-resistant human oral squamous cell carcinoma cells: T. Utaipan, et al.; Oncol. Rep. 37, 1243 (2017), Application(s): Flow Cytometry; oral squamous cell carcinoma (OSCC)
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