隨著生物治療藥物分子的表征需求迅速增加,包括糖基化在內(nèi)的翻譯后修飾的表征變得越來越重要。安捷倫推出新的糖苷酶產(chǎn)品,幫助客戶解決復雜的分析挑戰(zhàn)?,F(xiàn)已上市四種新的重組糖苷酶:
在通過?LC/FLD?對復雜樣品的單個聚糖結(jié)構(gòu)進行表征分析時,許多結(jié)構(gòu)不同的聚糖有可能共流出。這四種外切糖苷酶是簡化表征過程的關(guān)鍵工具:
● α(1-2)-甘露糖苷酶對寡糖非還原末端的α(1-2)-連接的甘露糖殘基具有高度特異性??捎糜跍y序、酶解至?Man5?結(jié)構(gòu)。
●??(1-4)-半乳糖苷酶可用于區(qū)分??(1-4)?和??(1-3)?半乳糖連接。
●?α(1-3,4,6)-半乳糖苷酶可用于鑒定可能具有潛在免疫原性的含?α-gal?聚糖(Galili?抗原)。
●?唾液酸酶?V?一般用于去唾液酸化,可與唾液酸酶?A(GK80040)?搭配使用,鑒定?α(2-9)?連接的唾液酸。
GK80060、GK80080?和?GK80085?帶有?His?標簽,客戶可通過?IMAC(固定化金屬親和色譜法)輕松去除酶解后多余的酶。
安捷倫還可以為客戶提供多種糖苷酶,包括內(nèi)切糖苷酶和外切糖苷酶。
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內(nèi)切糖苷酶是將低聚糖從糖蛋白及其他底物中釋放出來。這些酶可用于在分析前對糖蛋白進行去糖基化,或用于釋放N糖以進行標記和分析。
外切糖苷酶是一種糖苷水解酶,可酶解末端殘基的糖苷鍵。這些酶可用于研究游離的多聚糖、糖脂和糖蛋白。針對特定結(jié)合位點的外切糖苷酶也可用于低聚糖的測序。
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內(nèi)切糖苷酶 內(nèi)切糖苷酶可在多聚糖結(jié)構(gòu)內(nèi)進行裂解。N-糖酶(PNGase F,實際上為一種天冬酰胺酰胺酶)因具備釋放大多數(shù)完整 N糖的功能而廣泛用于研究游離多聚糖及生成去 N-糖基蛋白質(zhì)。
Agilent | GKE-5002 | AdvanceBio Endoglycosidase H | 內(nèi)切糖苷酶?H | 30 mU (200 ul) | 裂解高甘露糖型和一些雜合型 N-糖的? N,N'-二乙酰殼聚糖(GlcNAc-GlcNAc) 核心 |
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Agilent | GKE-5003 | PNGase F (native, Elizabethkingia mening | PNGase F | 100 mU (50 ul) | 通過在最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc 和 Asn 之間進行裂解, 釋放完 整 N-糖 |
Agilent | GKE-5006A | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | N-聚糖酶 (PNGase F) | 100mU in 40 ul | 通過在最內(nèi)側(cè)的?GlcNAc 和?Asn 之間進行裂解, 釋放完整?N-糖 |
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Agilent | GKE-5006B | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5006A-05 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 5×100mU in 40 ul |
Agilent | GKE-5006B-1 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 5×200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5006D | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F), >2.5 | 1U in 400ul |
Agilent | GKE-5008 | AdvanceBio Endo F2, recombinant | 內(nèi)切糖苷酶 F2 | 6 mU (60 ul) | 裂解高甘露糖型和二天線型復合 N-糖的殼二糖? (GlcNAcGlcNAc) 核心 |
Agilent | GKE-5010B | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | N-聚糖酶-plus | 400mU in 40ul | 通過在最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc 和 Asn 之間進行裂解, 釋放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5010D | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | 1U in 100ul |
Agilent | GKE-5010B-2 | AdvanceBio N-Glycanase-PLUS (PNGase F) | 5×400mU in 40ul |
Agilent | GKE-5016B | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | N-聚糖酶(PNGase F, 不含 EDTA) | 200mU in 80 ul | 通過在最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc 和 Asn 之間進行裂解, 釋放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5016A-05 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 5×100mU in 40 ul |
Agilent | GKE-5016B-1 | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 5×200mU in 80 ul |
Agilent | GKE-5016D | AdvanceBio N-Glycanase (PNGase F, EDTA-F | 1U in 400 ul |
Agilent | GKE-5020D | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | N-聚糖酶-ultra (PNGase F, 不含?EDTA) | 1U in 100ul | 通過在最內(nèi)側(cè)的 GlcNAc 和 Asn 之間進行裂解, 釋放完整 N-糖 |
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Agilent | GKE-5020B-5 | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | 5×400mU in 40ul |
Agilent | GKE-5020D-10 | AdvanceBio N-Glycanase-ULTRA (PNGase F, | 10×1U in 100ul |
Agilent | GKE-5011A | AdvanceBio PNGase A (almond), 2 mU | PNGase A | 2mU | 裂解糖肽 N-糖, 包括帶有 α(1, 3)-連接的核心巖藻糖的多聚糖, 常見于昆蟲和植物多聚糖 |
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Agilent | GKE-5011B | AdvanceBio PNGase A (almond), 10 mU | 10mU |
Agilent | GK80090 | AdvanceBio O-Glycanase | O-聚糖酶 | 50 mU (40 ul) | 從蛋白質(zhì)中釋放未取代的 Ser/Thr 連接的? GalGalNAc |
外切糖苷酶
外切糖苷酶可從多聚糖上裂解暴露或“末端”的單糖殘基。常用的外切糖苷酶包括用于去糖基化的半乳糖苷酶,以及用于 游離多聚糖、糖蛋白或細胞去唾液酸化的唾液酸酶(神經(jīng)氨酸酶)。
Agilent | GK80040 | AdvanceBio Sialidase A, 1 U | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶?A | 從低聚糖和糖蛋白中釋放?α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和α(2, 9)-連 接的唾液酸 |
Agilent | GK80045 | AdvanceBio Sialidase A, 51 kDa | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶?A-51 | 從低聚糖和糖蛋白中釋放?α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和?α(2, 9)-連 接的唾液酸 |
Agilent | GK80046 | AdvanceBio Sialidase A, 66 kDa | 1 U (200 ul) | 唾液酸酶?A-66 | 從低聚糖和糖蛋白中釋放?α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和?α(2, 9)-連 接的唾液酸 |
Agilent | GK80043 | AdvanceBio Sialidase A, Sampler Kit | 1 ea | 唾液酸酶 A | 從低聚糖和糖蛋白中釋放?α(2, 3)-、α(2, 6)-、α(2, 8)- 和α(2, 9)-連 接的唾液酸 |
Agilent | GK80030 | AdvanceBio Sialidase C, 1 U | 1 U (100 ul) | 唾液酸酶?C | 從低聚糖、糖蛋白、復雜碳水化合物中釋放?α(2-3, 6)-連接的唾液酸 |
Agilent | GK80021 | AdvanceBio Sialidase S, His-tagged | 3 U | 唾液酸酶?S | 從復雜碳水化合物中釋放?α(2-3)-連接的唾液酸 |
Agilent | GK80085 | AdvanceBio α(1-3,4,6)-Galactosidase | 5 U | α(1-3, 4, 6)-半乳糖苷酶 | 從低聚糖中釋放非還原末端?α(1-3, 4, 6)-連接的半乳糖 |
Agilent | GKX-5012 | β(1-4,6)-Galactosidase (jack bean) | 5 U lyophilized | β(1-4, 6)-半乳糖苷酶 | 酶水解非還原末端?Galβ(1-6)GlcNAc 和?Gal β(1-4)GlcNAc。 Galβ(1-3)GlcNAc? 水解緩慢 |
Agilent | GKX-5013 | β(1-3,4)-Galactosidase (bovine testis) | 0.5 U | β(1-3, 4)-半乳糖苷酶 | 酶水解非還原末端?β(1-3) 和?β(1-4) 連接的半乳糖 |
Agilent | GK80080 | AdvanceBio β(1-4)-Galactosidase, recomb | 200 mU | β(1-4)-半乳糖苷酶 | 從低聚糖和糖蛋白中釋放非還原末端?β(1-4)-連接的半乳糖 |
Agilent | GKX-5003 | β-N-Acetylhexosaminidase (jack bean) | 5U in 100ul | β-N-乙酰己糖胺酶 | 釋放非還原末端?β(1-2, 3, 4, 6)-連接的?N-乙酰氨基葡萄糖?(GlcNAc)? 和?N-乙酰半乳糖胺?(GalNAc) 殘基 |
Agilent | GK80050 | AdvanceBio β-N-Acetylhexosaminidase | 1.6 U | β-N-乙酰己糖胺酶 | 酶裂解所有非還原末端?β-連接的?N-乙酰氨基葡萄糖?(GlcNAc) |
Agilent | GKX-5023 | β-(1-2,3,4,6)-Hexosaminidase, Sequencing | 15U in 50ul | β(1-2, 3, 4, 6) N-乙酰己糖胺酶 | 釋放非還原末端?β(1-2, 3, 4, 6)-連接的?N-乙酰氨基葡萄糖?(GlcNAc) 和?N-乙酰半乳糖胺?(GalNAc) 殘基 |
Agilent | GK80075 | AdvanceBio α(1-2)-Mannosidase (recomb) | 2 mU | α(1-2)-甘露糖苷酶 | 從低聚糖的非還原末端釋放?α(1-2)-連接的甘露糖殘基 |
Agilent | GKX-5010 | α(1-2,3,6)-Mannosidase (jack bean) | 10 U | α(1-2, 3, 6)-甘露糖苷酶 | 從低聚糖中釋放非還原末端?α(1-2, 3, 6)-連接的甘露糖 |
Agilent | GKX-5010-50 | α(1-2,3,6)-Mannosidase (jack bean) | 5 x 10U |
Agilent | GK80060 | AdvanceBio Sialidase V, recombinant 1 U | 1 U | 唾液酸酶?V | 從低聚糖和糖蛋白中釋放?α(2, 3)- 和?α(2, 6)-連接的唾液酸。 同時對?α(2, 8)-連接的唾液酸具有一定的活性 |
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