活體轉(zhuǎn)染是指可以直接應(yīng)用于動物體的轉(zhuǎn)染方法。Mirus的活體核酸遞送(轉(zhuǎn)染)實驗試劑專門為小鼠設(shè)計,可以將核酸安全高效地注入活體實驗室小鼠,可用于基因敲除研究中siRNA的傳遞或肝臟中的基因表達(dá)研究的DNA傳遞。
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TransIT?-QR Delivery Solution ???MIR 5240
特點:
裸核酸傳遞-與聚賴氨酸和PEI方法相比,實現(xiàn)更高水平的基因表達(dá)。?
多功能平臺-用于DNA或siRNA傳遞,使用流體動力尾靜脈注射進小鼠體內(nèi)。?
超低細(xì)胞毒性:與生理鹽水注射相比,心臟輸出量損失最小,可在注射后(幾分鐘內(nèi))迅速恢復(fù)。?
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TransIT-QR Delivery Solution將Label ITCy3 RNAi Delivery Control運送到肝細(xì)胞。使用TransIT-QR Delivery Solution通過尾靜脈流體動力學(xué)將25μg Label ITCy3 RNAi Delivery Control(紅色)運送給小鼠。注射45分鐘后取肝切片固定,復(fù)染細(xì)胞核(藍(lán)色)和肌動蛋白(綠色)。
與使用生理鹽水注射相比,TransIT-QR溶液最大限度地減少心輸出量的損失。將小鼠麻醉后與動脈血壓計相連,通過使用流體動力尾靜脈注射系統(tǒng)注射TransIT-QR遞送溶液(紅色)或生理鹽水(藍(lán)色)至小鼠體內(nèi)。以心率乘以脈壓(收縮壓和舒張壓之間的差)來估計相對心輸出量,并與注射前心輸出量進行對比。
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“增強表達(dá)”的體內(nèi)遞送試劑-TransIT-EE Delivery Solution??MIR 5340?
特點:
裸核酸傳遞-與TransIT- QR遞送試劑、TransIT- In Vivo基因傳遞系統(tǒng)、聚賴氨酸和PEI方法相比,實現(xiàn)更高的基因表達(dá)水平。
多功能平臺-適合使用流體動力尾靜脈注射到小鼠中進行DNA傳遞。
TransIT-EE試劑可增強肝臟中熒光素酶的表達(dá)。使用TransIT-QR或TransIT-EE遞送試劑10 μg熒光素酶表達(dá)載體通過流體動力傳遞尾靜脈注射系統(tǒng)運送給小鼠。注射24小時后收集肝臟并測定熒光素酶活性。?
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TransIT-EE溶液可增強多種器官中熒光素酶的表達(dá)。使用TransIT-QR或TransIT-EE遞送液,采用流體動力尾靜脈注射系統(tǒng)將10μg pCI-Luc (CMV啟動子驅(qū)動熒光素酶表達(dá)載體)運送至小鼠。注射24小時后收集器官并測定熒光素酶活性。
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實驗室小鼠肝臟中實現(xiàn)長期表達(dá)的載體系統(tǒng)--pLIVE體內(nèi)表達(dá)/報告載體??
貨號 | 名稱 |
MIR 5420 | pLIVE Vector |
MIR 5520 | pLIVE Vector/lacZ Control Vector Kit |
MIR 5620 | pLIVE Vector/SEAP Control Vector Kit |
MIR 5320 | pLIVE Vector Complete System |
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特點:
持續(xù)的基因表達(dá)-注射后8個月,小鼠肝臟實現(xiàn)長期的肝臟基因表達(dá)
通用平臺-可用于表達(dá)LacZ或SEAP的陽性對照載體
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pLIVE載體中的啟動子在肝臟長期表達(dá)方面優(yōu)于CMV啟動子。pLIVE-SEAP載體(20 μg)和pCMV-SEAP (10 μg, CMV啟動子驅(qū)動的SEAP載體)分別通過水動力尾靜脈注射系統(tǒng)和TransIT-QR水動力運送液(MIR 5240)給4只ICR小鼠。?在注射后的指定天數(shù),收集每只小鼠的血清,使用Phospha-Light?SEAP測定試劑盒(Applied Biosystems)測定SEAP活性水平。比較每組的平均SEAP活性。
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水動力尾靜脈注射pLIVE-lacZ載體后?-半乳糖苷酶在肝臟的強表達(dá)。?pLIVE-lacZ載體(圖A)通過流體動力尾靜脈注射系統(tǒng)和TransIT-QR流體動力運送溶液(MIR 5240)被輸送到ICR小鼠體內(nèi)。注射24小時后,取肝臟切片,X-gal染色,檢測?-半乳糖苷酶活性(藍(lán)色細(xì)胞)。?然后用蘇木精和伊紅Y復(fù)染細(xì)胞,分別染色細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。?圖B中的對照組小鼠(lacZ陰性)與圖A平行染色,未發(fā)現(xiàn)?-半乳糖苷酶活性。?
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