InvivoGen公司開發(fā)了在能在細(xì)胞水平檢測(cè)模式識(shí)別受體(pattern recognition receptor,PRR)的配體的篩選技術(shù)服務(wù),InvivoGen可以從以下不同PRR來篩選您的化合物,以確定與傳染病、自身免疫和癌癥相關(guān)的先天免疫信號(hào)通路的有效激活劑或抑制劑。
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● TLR Ligand Screening
TLR配體篩選服務(wù)利用HEK-Blue TLR cells。這些HEK293衍生的細(xì)胞是穩(wěn)定表達(dá)人或小鼠TLR基因的NF-kB-SEAP報(bào)告細(xì)胞。表達(dá)的TLR基因是TLR2、3、4、5、7、8和9。
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●?NOD1/2 Ligand Screening
NOD1/2配體篩選服務(wù)利用HEK-Blue NOD cells。這些HEK-Blue NOD cells穩(wěn)定表達(dá)NF-κB誘導(dǎo)型SEAP報(bào)道基因和人或小鼠NOD1或NOD2基因?;衔锟稍谌撕?或小鼠NOD1和NOD2上測(cè)試。
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●?STING Ligand Screening
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●?RIG-I/MDA5 Ligand Screening
RIG-I/MDA-5配體篩選服務(wù)利用利用IRF途徑的HEK293細(xì)胞系和分泌型熒光素酶報(bào)告分析。它們過度表達(dá)人RIG-I或MDA-5基因,對(duì)5'ppp-dsRNA和轉(zhuǎn)染的poly(I:C)分別高度敏感。化合物可以在人RIG-1和/或MDA-5上測(cè)試。
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●?Dectin-1 Ligand Screening
Dectin-1配體篩選服務(wù)利用HEK-Blue? Dectin-1 cells。這些細(xì)胞系表達(dá)不同的Dectin-1基因亞型。除了一個(gè)NF-κB誘導(dǎo)型SEAP報(bào)道基因外,它們還表達(dá)Dectin-1-NF-κB信號(hào)通路的基因?;衔锟稍谌薉ectin-1a、人Dectin-1b和/或小鼠Dectin-1a上測(cè)試。
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●?Mincle Ligand Screening
Mincle配體篩選服務(wù)利用HEK-Blue? hMincle cell line。該細(xì)胞共表達(dá)人單核巨噬細(xì)胞基因、單核巨噬細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路基因和NF-κB誘導(dǎo)型SEAP報(bào)告基因??梢赃M(jìn)行激動(dòng)劑和拮抗劑試驗(yàn),盡管目前還沒有鑒定出對(duì)Mincle具有抑制活性的配體。
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服務(wù)優(yōu)勢(shì):
→ 篩選服務(wù)速度快—篩選周轉(zhuǎn)時(shí)間僅3周
→?篩選服務(wù)靈活性高-可以根據(jù)客戶要求選擇和/或修改篩選參數(shù)。
→?篩選多種化合物成本更低
→?可靠性高—InvivoGen的篩選服務(wù)多年來一直被領(lǐng)先的生物技術(shù)和制藥公司以及學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)所使用。
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TLR、NOD和RLR信號(hào)通路簡(jiǎn)明示意圖
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InvivoGen開發(fā)了一系列功能性細(xì)胞分析來篩選激活或抑制模式識(shí)別受體(PRRs)的化合物,重點(diǎn)是TLRs、NOD1/2、RIG-I/MDA-5、C型凝集素和STING。這些敏感的分析采用了工程化的HEK293細(xì)胞,該細(xì)胞利用了經(jīng)典的報(bào)告系統(tǒng):一個(gè)NF-kB誘導(dǎo)型SEAP(分泌型胚胎堿性磷酸酶)和/或一個(gè)IRF(干擾素調(diào)節(jié)因子)誘導(dǎo)型sLUC(分泌型熒光素酶)。可以提供2種服務(wù)選擇:
1. 復(fù)合物的初步檢測(cè)(第一階段):對(duì)一組模式識(shí)別受體進(jìn)行單劑量測(cè)試。篩選是在單一濃度下進(jìn)行的,通常是提供的原始化合物溶液的1:10稀釋度,或客戶指定的濃度。
2. 復(fù)合物不同劑量測(cè)試分析(第二階段):選取復(fù)合物樣本的三種不同濃度,通常為1:10、1:100、1:1000稀釋比例,來進(jìn)行復(fù)合物激活模式識(shí)別受體的活性分析,可以根據(jù)客戶要求進(jìn)行定制。
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