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GeneTex超強(qiáng)WB發(fā)光底物

2021-05-18
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免疫印跡試驗(yàn)(Western blot)是利用抗體與抗原間的專一性結(jié)合來偵測特定蛋白質(zhì)的表現(xiàn),為現(xiàn)代生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)中常見的實(shí)驗(yàn)方法,也被廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)水平的研究、抗體活性檢測和早期疾病診斷等多個(gè)方面。

免疫印跡試驗(yàn)的技術(shù)是結(jié)合蛋白質(zhì)膠體電泳 (gel electrophoresis)的高度解析力、抗體的專一性以及酵素的敏感性,使得科學(xué)家們得以在復(fù)合物中大海撈針般的尋找蛋白質(zhì)的存在。一開始以電泳將蛋白質(zhì)進(jìn)行大小排列與分離,再利用電場將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到膜上,接著,擁有抗原表位的蛋白質(zhì)分子就可被抗體(一抗)特異性識別并與之結(jié)合。在此基礎(chǔ)上,酶或熒光標(biāo)記的二抗再進(jìn)一步識別并結(jié)合一抗,通過與底物反應(yīng)顯色來觀察目標(biāo)蛋白的表現(xiàn)。


Western blot若利用酵素反應(yīng)呈色,由于受質(zhì)的不同,顯色的方法可區(qū)分為:

一、化學(xué)冷光法: Chemiluminescent-based signal detection。

二、直接呈色法:Colormetirc/Chromogen-based signal detection。

三、熒光呈色法:Fluorescent substrate-based signal detection。

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發(fā)表文獻(xiàn)上,又以化學(xué)冷光法為最常使用及最方便的呈色方法

化學(xué)冷光法(Chemiluminescent-based signal detection)的原理是利用二抗接上辣根過氧化物酶(HRP),在H2O2存在時(shí),HRP會(huì)氧化化學(xué)發(fā)光物質(zhì)魯米諾(lumino,氨基苯二酰一肼)而發(fā)出冷光,加上化學(xué)增強(qiáng)劑的作用,冷光強(qiáng)度可以增大1,000倍以上?;瘜W(xué)冷光法操作簡便,只需將兩種顯色底物等體積混合,再將轉(zhuǎn)印后的膜覆蓋在上進(jìn)行呈色反應(yīng),后續(xù)訊號偵測可藉由底片感光、顯影、定影等沖洗步驟,或是自動(dòng)化光學(xué)檢測儀器來得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。


GeneTex超強(qiáng)WB發(fā)光底物

圖一: 化學(xué)發(fā)光底物作用示意圖

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GeneTex 開發(fā)的Trident HRP substrate (化學(xué)發(fā)光底物)系列產(chǎn)品,原本僅供公司內(nèi)實(shí)驗(yàn)室使用,因客戶詢問度高,且經(jīng)過上萬筆實(shí)驗(yàn)測試,2016年正式將其產(chǎn)品化,提供給客戶使用。



GeneTex Trident HRP substrate系列產(chǎn)品優(yōu)勢:

1.靈敏度高:

優(yōu)于市面產(chǎn)品(見圖), 最高可檢測到飛克 (femtogram ;10-15?g)級的蛋白

2.穩(wěn)定性強(qiáng):

A、B試劑單獨(dú)存放28℃, 避光條件下可保存12個(gè)月

3.節(jié)約時(shí)間:

不需做條件優(yōu)化, 入門新生立即可輕松上手

4.節(jié)省樣品:?

對于樣品珍貴或是表達(dá)量少的蛋白, 僅需少量蛋白即可偵測

5. 背景值低:雜訊少, 訊號強(qiáng)



產(chǎn)品名

Trident plus Western HRP Substrate

Trident pico Western HRP Substrate

Trident femto Western HRP Substrate

貨號

GTX400006

GTX17435

GTX14698

應(yīng)用與特色

一般日常操作

長時(shí)間或多次曝光

微量蛋白

靈敏度

皮克picogram

(10-10~10-12)

皮克

picogram (10-12)

飛克

femtogram (10-15)

包裝大小

500 ml

100 ml

500 ml

100 m

200 ml

人民幣售價(jià)

2,499

999

2,999

1,899

3,299



圖二:化學(xué)發(fā)光底物飛克級蛋白測試

GeneTex超強(qiáng)WB發(fā)光底物


圖三:化學(xué)發(fā)光底物皮克級蛋白測試



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