使用抗體時選單抗還是多抗？相信很多同學(xué)都有這個疑問，單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別呢？這個問題問得好，因為它們無論是在生產(chǎn)過程還是用途上都非常不同，了解了這些知識以后對選擇合適抗體有很大的幫助。本篇總結(jié)了很多資料，下面就來給大家一一解答。

首先列出一個表格，讓大家對多克隆抗體和單克隆抗體有一個簡單的認識和對比

那么到底什么是單克隆抗體呢?

單克隆抗體的定義:單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結(jié)合的單一抗體。

單克隆抗體的制備

簡單來說就是將免疫原注射到宿主動物體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，之后把B細胞從脾臟中移出，單種B細胞與骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤，成為一個永生化胞株。這樣一來，雜交瘤的B細胞就會一直產(chǎn)出只識別單一表位的單克隆抗體，通常這個胞株會有一個特定的克隆號（clone number），用來與其他胞株區(qū)分。

雜交瘤接下來可以被注射到小鼠的腹腔中大量生產(chǎn)，雜交瘤分泌富含抗體的一種液體，被稱作腹水，用注射器抽取純化，就可獲得大量的單克隆抗體。

單克隆抗體更適用于:

• 檢測單一抗原

• 檢測蛋白質(zhì)家族的單一成員

• 不同實驗/批次的抗體檢測結(jié)果穩(wěn)定一致

• 細胞染色背景較低-很適用于IHC、ICC、IF 等應(yīng)用

• 量化蛋白質(zhì)表達 (例：流式或熒光細胞分選)

• 探測分子結(jié)構(gòu)變化

• 探測磷酸化狀態(tài)的變化

• 為X射線晶體測試探測目標

• 制作缺少特定細胞類型的動物模型

• 免疫治療

• 單克隆抗體不建議用于:

• 根據(jù)同源性檢測不同物種的目標蛋白

• 檢測濃度較低的目標蛋白

• 檢測形態(tài)變化了的蛋白

什么是多克隆抗體呢?

多克隆抗體定義:多克隆抗體是指與目標蛋白上多種不同表位結(jié)合的多種不同抗體.

多克隆抗體制備

多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣，都是將免疫原注射到宿主體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，激活了多種B細胞。不同的是免疫過后，多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來，或接著進行純化，沒有與骨髓瘤細胞融合的過程。一旦宿主動物死亡，需要免疫新的動物，這時血清中的抗體就會有所不同。

雖然多抗每批次有輕微差別，但是因為它識別的表位多，這個差別影響并不算太大，而單克隆抗體雖然價格偏高，可是特異性更強更穩(wěn)定?？梢哉f單抗和多抗是各有各的優(yōu)點。

多克隆抗體更適用于:

• 檢測有高同源性的抗原的已知或未知同種型

• 檢測濃度較低的抗原

• 捕獲盡可能多的抗原 (例如 IP 或 ChiP)

• 檢測變性的蛋白

• 檢測可能發(fā)生了糖基化或形態(tài)變化的目標蛋白

• 用多種檢測方法檢測一種原蛋白時

• 檢測 pH 和鹽度不同的溶液中的目標蛋白

多克隆抗體不建議用于:

• 量化檢測，比如：流式。由于不同表位的結(jié)合導(dǎo)致信號被放大加強，可能會導(dǎo)致結(jié)果不準確

• 當高同源性蛋白的交叉反應(yīng)會引起問題時

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