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助力Omicron研究,InvivoGen推出變異株質(zhì)粒

2022-01-06
瀏覽次數(shù): 135

Omicron(奧密克戎新冠變異毒株(Clade 21K/ B.1.1.529(BA.1))來勢洶洶,比其他令人擔憂的變異株具有更高的再次感染風險。這個變體存在大量突變,其中一些是令人擔憂的。為此,InvivoGen推出了Omicron(奧密克戎變異株假型質(zhì)粒和Omicron(奧密克戎變異株表達質(zhì)粒,這些質(zhì)粒編碼了Omicron(奧密克戎變異株的Spike全長序列。


SARS-CoV-2 Spike假型質(zhì)粒-Omicron變異株

InvivoGen提供一系列編碼了各種Spike變異株的pLV-Spike質(zhì)粒,可與包裝質(zhì)粒和GFP報告質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞,這些質(zhì)??梢陨蒘pike假型慢病毒顆粒。假型慢病毒顆粒感染了表達SARS-CoV-2宿主受體的易感細胞系(例如A549-hACE2-TMPRSS2或HEK-Blue? hACE2-TMPRSS2細胞)后,可以通過GFP表達量進行測定。此方法適合于病毒進入研究,并可用于測試抗體和小分子抑制劑的中和潛力。


其中,pLV-SpikeV11編碼了Omicron(奧密克戎)變異株(Clade 21K/ B.1.1.529(BA.1))的Spike全長序列。為了獲得最佳的表達效果。InvivoGen對密碼子進行了優(yōu)化并去除了Cterminal ER-retention signal,該質(zhì)粒可與報告質(zhì)粒和輔助蛋白質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染后產(chǎn)生Spike假型慢病毒顆粒,也可用于SARS-CoV-2抑制劑的篩選。?助力Omicron研究,InvivoGen推出變異株質(zhì)粒?


質(zhì)粒特征

序列參考:?EPI_ISL_6699761.1

密碼子優(yōu)化

ORF大小:?3756 bp


測序引物:
- Forward rbt β-globin intron: TGGTTACAATGATATACACTG
- Reverse rbt?β-globin pAn: CTCAAGGGGCTTCATGATGTC


質(zhì)量控制:
- 質(zhì)粒通過限制性內(nèi)切酶分析和全長開放閱讀框 (ORF) 的測序來確認
- 離子交換色譜純化后,電泳確認超螺旋構(gòu)象

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SARS-CoV-2 Spike表達質(zhì)粒-Omicron變異株

pUNO1-SpikeV1和pUNO1-SpikeV11-dfur是專為在哺乳動物細胞中表達SARS-CoV-2 Spike (S)蛋白而設(shè)計的質(zhì)粒,包含含有功能性furin裂解位點或無活性的furin裂解位點兩種形式。為了獲得最佳的表達效果。InvivoGen對這兩個質(zhì)粒的密碼子進行了優(yōu)化并去除了Cterminal ER-retention signal,可用于SARS-CoV-2抑制劑的篩選,包括小分子、單克隆抗體、康復(fù)期血漿。pUNO1-SpikeV11含有功能性furin裂解位點,推薦用于Spike/ACE2細胞融合實驗;pUNO1-SpikeV11-dfur含有無活性的furin裂解位點,推薦用于流式細胞術(shù)檢測細胞表面。



質(zhì)粒特征

貨號

pUNO1-SpikeV11

pUNO1-SpikeV11-dfur

序列參考

EPI_ISL_6841980

EPI_ISL_6841980


密碼子優(yōu)化

密碼子優(yōu)化和R683/5A突變

ORF大小

3756 bp

3756 bp

測序引物

- Forward HTLV 5’UTR: TGCTTGCTCAACTCTACGTC
- Reverse SV40 pAn: AACTTGTTTATTGCAGCTT

- Forward HTLV 5’UTR: TGCTTGCTCAACTCTACGTC
- Reverse SV40 pAn: AACTTGTTTATTGCAGCTT

質(zhì)量控制

-質(zhì)粒通過限制性內(nèi)切酶分析和全長開放閱讀框 (ORF) 的測序來確認

-離子交換色譜純化后,電泳確認超螺旋構(gòu)象

?

相關(guān)產(chǎn)品信息

貨號

名稱

規(guī)格

plv-spike-v11

pLV-SpikeV11

20 μg

p1-spike-v11

pUNO1-SpikeV11

20 μg

p1-spike-v11-df

pUNO1-SpikeV11-dfur

20 μg

?

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