當(dāng)您在使用StressMarq生產(chǎn)的標(biāo)記抗體產(chǎn)品時，可能對產(chǎn)品或者是在實驗時有遇到一些問題。本篇就是針對我們的標(biāo)記抗體客戶常見的一些問題解答，希望可以幫助到大家。如果里面列舉的問題沒有您所關(guān)注的，可以咨詢我們的代理商欣博盛生物，協(xié)助您處理這些問題。
一、我怎么選擇合適的熒光標(biāo)記?
答：當(dāng)選擇熒光標(biāo)記時，需要自問以下問題：
您顯微鏡上的濾光片/激光源是什么?
首先您需要知道您顯微鏡上的濾光片/激光源。他們將會決定您可以使用什么樣的熒光蛋白或染料用來激發(fā)和顯現(xiàn)。
您計劃在一個樣品上應(yīng)用幾個熒光素？
如果您在樣品上使用一個以上的熒光素，那么您需要仔細(xì)挑選其他的熒光染料來最小化光譜重疊。您可以通過查看激發(fā)和發(fā)射光譜來決定使用哪一對染料，以降低他們的激發(fā)和發(fā)射光譜重疊。
如果您使用激光來激發(fā)熒光素，您只要確保您的激光 (ie. 488 nm) 不會同時激發(fā)兩種以上的染料即可。如果該激光可觸發(fā)到第二個熒光染料的激發(fā)光譜，那么在激發(fā)第一個染料時您可能會少量地激發(fā)到了第二個染料，而如果這時您的濾光片也能接受第二個染料的發(fā)射光，您就會得到不準(zhǔn)確的信號。
然而如果您用來接收發(fā)射光譜的濾光片剛好不能接收到第二個染料發(fā)射的光，那么您拍得的圖片就看不到這段重疊光譜，就沒有問題。
二、抗體標(biāo)記是怎么與抗體結(jié)合的？
答：標(biāo)記與抗體是共價鍵結(jié)合的，非常穩(wěn)定。
三、每個抗體可以結(jié)合幾個標(biāo)記？
答：根據(jù)被標(biāo)記抗體和標(biāo)記的不同，一個抗體可以結(jié)合1~10個標(biāo)記。
四、抗體標(biāo)記結(jié)合在抗體的什么位置？
答：抗體標(biāo)記是結(jié)合在抗體游離的氨基基團上的。由于抗體Fc區(qū)域的游離氨基基團較多，所以標(biāo)記通常是結(jié)合在抗體的Fc區(qū)域。然而標(biāo)簽很可能會與抗體決定簇結(jié)合從而使抗體與抗原的結(jié)合受阻。雖然這個可能性較低，但是還是會影響該抗體在某種應(yīng)用中與抗原的結(jié)合能力。 ? [indent]由于我們沒辦法控制標(biāo)簽與抗體的結(jié)合過程，所以我們不可能完全確定他們結(jié)合的位置。
五、標(biāo)記抗體怎樣保存？
答：所有保存在含50%甘油的緩沖液中的標(biāo)記一抗都可以儲存在-20℃。緩沖液中不含50%甘油的標(biāo)記抗體應(yīng)儲存在4℃。
六、標(biāo)記一抗穩(wěn)定嗎？
答：儲存在4℃的標(biāo)記一抗保質(zhì)期18個月，-20℃保存的標(biāo)記一抗保質(zhì)期可達(dá)2年。請參見“標(biāo)記抗體怎樣保存？”了解更多儲存信息。
七、為什么標(biāo)記了的抗體和未標(biāo)記的實驗效果不同？
答：在罕見情況下，標(biāo)記標(biāo)簽可能會阻擋了抗體結(jié)合部位，因此限制了抗體與抗原結(jié)合的能力。雖然這種情況罕見，但是確實有可能影響抗體在各種應(yīng)用中結(jié)合抗原的效果。由于我們沒辦法控制標(biāo)簽與抗體的結(jié)合過程，所以我們不可能完全確定他們結(jié)合的位置。
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