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Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測

2022-06-29
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proteinA殘留檢測


金黃色葡萄球菌A蛋白(Staphylococal Protein A,SPA)是一種從金黃色葡萄球菌細胞壁分離的蛋白質(zhì)。能特異性地與人或哺乳動物抗體(主要是IgG)的Fc區(qū)域結(jié)合。所以常常使用protein A的柱子來分離純化單克隆抗體。但是在抗體純化過程中,protein A能夠從柱子中析出,容易導(dǎo)致抗體的污染,抗體中的protein A會引發(fā)人體的免疫反應(yīng),所以使用治療的單抗需要嚴格檢測其中protein A的含量。Enzo提供的protein A ELISA Kit能夠快速有效檢測單克隆抗體中protein A的含量。

Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測

Protein A標準曲線

A.alphaLISA protein A assay. A 12-point dilution series of the positive control was prepared ranging from 100.000-0.3pg/ml was prepared. 12 background points were used to calculate LDL. ?


B.Protein A ELISA assay. A 9-point dilution series of the positive control was prepared ranging from 100,000-10pg/ml.

Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測Residual Protein A screen of a panel of human antibodies. A panel of 10 human antibodies was screened for detectible levels of protein A。
Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測煮沸后不同protein A結(jié)構(gòu)的分析識別。從試劑盒標準曲線中插值得到濃度。通過 將觀察到的濃度除以預(yù)期濃度計算出的回收率百分比。 A. Natural Protein A from S. aureus (Millipore), n=9; B. Recombinant Protein A from E. coli (Repligen), n=9; C. Recombinant Cys-Protein A from E. coli (GE), n=12; and D. Recombinant alkaline-resistant Protein A variant from E. coli (MabSelet SuRe from GE), n=12; graphical data represents statistical mean +/- 1 standard deviation。
產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格
ADI-900-057Protein AELISAkit1*96 wells


Enzo的ProteinAELISAKit的特點

● 高靈敏度測量,檢測純化人源化單克隆抗體制劑中低至9.01pg/ml(< 1 ppm)的protein A殘留。

● 確保準確的結(jié)果,因為它能識別不同幾種結(jié)構(gòu)的protein A。

● 高通量形式,可檢測多達的37份樣品(復(fù)孔),耗時不到3小時。

● 與其他技術(shù)相比,提供了經(jīng)濟高效的解決方案,降低每次測試成本。

● 十分適用于單克隆抗體制劑中protein A變體的污染分析和測量。


Hostcell protein 殘留檢測


宿主細胞蛋白(hostcellprotein, HCP)是指生物制品中來自生產(chǎn)細胞系的宿主細胞的蛋白成分,主要包括宿主細胞分泌的蛋白以及細胞凋亡、代謝產(chǎn)生的部分結(jié)構(gòu)蛋白。作為生物制品生產(chǎn)過程中的殘留雜質(zhì),HCP具有潛在的安全風險,包括誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。建立合適的HCP殘留量檢測方法將有助于監(jiān)測生產(chǎn)工藝,確保生物制品的質(zhì)量和安全。Enzo可以提供靈敏的ELISA定量測定中國倉鼠卵巢(CHO)表達系統(tǒng)中和大腸桿菌(E.coli)表達的蛋白中的宿主細胞蛋白質(zhì)污染。

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格
ENZ-KIT128-0001CHO host cell protein ELISA kit1*96 wells
ENZ-KIT127-0001E. coli host cell protein ELISA kit1*96 wells


產(chǎn)品特點

● CHO宿主細胞蛋白質(zhì)的靈敏測量,檢測低至10 ng/ml;大腸桿菌宿主細胞蛋白質(zhì)的靈敏測量,檢測低至30ng/ml

● 檢測差異小,穩(wěn)定性好

● 高通量形式,3小時內(nèi)可以產(chǎn)生結(jié)果

● 完全定量結(jié)果超過半定量蛋白質(zhì)印跡分析的


蛋?聚集檢測


Enzo可以為監(jiān)測溶液中的肽和蛋白質(zhì)聚集提供了簡單的分析試劑盒。這對于確定蛋白質(zhì)的最佳儲存配方、篩選促進或抑制蛋白質(zhì)聚集的化合物以及潛在的分子伴侶活性的靈敏測量是有重要作用的。該試劑盒可用于簡化蛋白質(zhì)加工和配方優(yōu)化程序。相對于傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)聚集檢測染料,例如硫黃素T,Enzo檢測試盒可以檢測更寬范圍的蛋白質(zhì)聚集,產(chǎn)生更亮的信號,提供至少2個數(shù)量級的線性動態(tài)范圍,并在寬范圍的pH值(4~10)和緩沖劑組合物中提供優(yōu)異的能。該分析的靈敏度在亞微摩爾范圍內(nèi),在濃縮的蛋白質(zhì)溶液中可檢測到少至1-5%的蛋白質(zhì)聚體。該分析能夠以穩(wěn)定和高通量的方式提供蛋白質(zhì)聚集的定量分析(z’因子得分> 0.5)。凍干的天然和聚集蛋白作為陰性和陽性對照,用于監(jiān)測蛋白聚集狀態(tài)的變化。

Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測使用Enzo檢測試劑和硫黃素T進行抗體聚 集物檢測的有效線性動態(tài)范圍。

產(chǎn)品貨號產(chǎn)品名稱規(guī)格
ENZ-51023-KP002PROTEOSTAT? Protein aggregation assay2*96 tests
ENZ-51023-KP050PROTEOSTAT? Protein aggregation assay50 tests


產(chǎn)品特點:

● 一種簡單、靈敏、溫度的熒光檢測方法

● 可用于微孔板或流式細胞儀平臺

● 可以幫助優(yōu)化蛋白質(zhì)制劑緩沖液和賦形劑

● 在較寬的pH值和離子強度范圍內(nèi)使用


蛋?熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測


Enzo提供的熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測試劑盒包括檢測蛋白質(zhì)聚集的熒光染料,因此它可用于監(jiān)測系統(tǒng)熱應(yīng)力條件下的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。從熱轉(zhuǎn)移試驗中,可以容易地確定大部分蛋白質(zhì)聚集的溫度。聚集溫度是蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的指標,可用于優(yōu)化使蛋白質(zhì)聚集最小化的條件,以及鑒定結(jié)合感興趣蛋白質(zhì)并賦予其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的配體。

Enzo — proteinA和宿主細胞殘留以及蛋白聚集檢測使用Enzo檢測試劑和硫黃素T進行抗體聚集物檢測的有效線性動態(tài)范圍。

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格
ENZ-51027-K400PRO ? TEOSTAT Thermal shift stability assay kit400 tests
ENZ-51027-K100PRO ? TEOSTAT Thermal shift stability assay kit100 tests


產(chǎn)品特點

● 是一種不需要樣品分離或稀釋的簡單、靈敏、穩(wěn)定的熒光分析方法

● 能夠加速優(yōu)化蛋白質(zhì)穩(wěn)定性條件

● 可以檢測配體結(jié)合,即使事先不知道蛋白質(zhì)的功能或配體結(jié)合位點

● 在較寬的溫度、pH和離子強度范圍內(nèi)工作,并與常用緩沖劑和賦形劑兼容


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