星光染料是一種獨(dú)特的熒光納米粒子，將它與 Bio-Rad 高度驗(yàn)證的抗體結(jié)合，專為流式細(xì)胞術(shù)開發(fā)，為您提供卓越染色效果。星光染料使稀有群體和低密度抗原易于分辨，同時(shí)保持適用于任何多色實(shí)驗(yàn)的靈活性。
本篇將幫助你了解高亮星光染料如何助力流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)。
優(yōu)勢(shì)：
不僅亮，且發(fā)射波譜窄
省，無(wú)需特殊染色溶液
穩(wěn)，批間重現(xiàn)性好
和，溶液兼容性好
活，與所有儀器和抗體可共用
第一批上市染料
StarBright Blue
StarBright Violet
明亮，溢漏減少
星光染料具有優(yōu)化的激發(fā)和發(fā)射特性，并具有優(yōu)越的亮度。它可以更好地分辨特定細(xì)胞群，包括稀有和低密度抗原，同時(shí)最大限度地減少熒光溢漏，更大程度地避免染料在多色方案中擴(kuò)散現(xiàn)象。用星光染料，你可以輕松地建立更大的實(shí)驗(yàn)方案。
圖1. 和同類染料相比，星光染料改進(jìn)了亮度和熒光溢漏。A, 和其它兩個(gè)染料相比，SBB700（粉紅色）在640nm只是非常有限的被激發(fā)。B, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD4 AMO (Cat.#MCA1267AMO）、CD4 Brilliant Violet 510和CD4 StarBright Violet 515(#MCA1267SBV515)分別染色，所有數(shù)據(jù)在ZE5流式細(xì)胞分析儀上采集。直方圖顯示了這些抗體的亮度，圖片右側(cè)顯示了這三種染料的染色指數(shù)。
很容易融入到你現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)
它們與大多數(shù)染色方案兼容，幾乎可以在任何緩沖液中工作，包括商用聚合物染色緩沖液，它們的性能不會(huì)有損失（圖 2）。它們可以與其他星光染料、有機(jī)熒光染料、基于蛋白質(zhì)的熒光染料和其他聚合物染料結(jié)合，而不需要特殊染色方案（圖 2C），使您可以輕松構(gòu)建更大的多色實(shí)驗(yàn)方案。
圖2. 緩沖溶液的兼容性。人外周血分別在含有BSA、EDTA和NaN3的緩沖液中，A, 用CD4 Pacific Blue和CD4 SBV440染色，B, 用CD4 BV510和CD4 SBV515染色，星光染料的性能均沒(méi)有下降。C, 人外周血在含1%BSA的PBS溶液中用CD3 A488 (#MCA463A488), CD19 SBB700 (#MCA1940SBB700), CD4 SBV515 (#MCA1267SBV515), CD8 SBV440 (#MCA1226SBV440), CD127 A647 (#HCA145A647), and CD25 PE (#MCA2127PE)染色，所有數(shù)據(jù)在ZE5流式細(xì)胞分析儀上采集。與其他基于聚合物的染料不同，組合多種星光染料不需要特殊的染色緩沖液。
與所有流式細(xì)胞儀兼容
StarBright 染料在 ZE5 流式細(xì)胞分析儀上開發(fā)出來(lái)，可以用于任何帶有合適激光器和濾光片的流式細(xì)胞儀，包括流式細(xì)胞分選儀。此外，它們也已經(jīng)被用在光譜流式細(xì)胞儀上。
圖 3. 儀器兼容性。人外周血在含 1%BSA 的 PBS 中，用 CD8 SBV610（#MCA1226SBV610）、CD4 SBV515（#MCA1267SBV515）、CD127 A647（#HCA145A647）和 CD25 SBV440（#MCA2127SBV440）4℃染色 30 分鐘。使用 A, 常規(guī)流式細(xì)胞儀和 B, 光譜流式細(xì)胞儀獲得了
類似的 Treg（ CD4+、CD25+、CD127lo）結(jié)果。C, 光譜流式上，人外周血用 CD4BV605 和 CD8SBV610（MCA1226SBV610）染色，易于識(shí)別。
批間重現(xiàn)性好
與某些聚合物和其他染料不同，星光染料可以具有很高的批間重現(xiàn)性（圖 4），穩(wěn)定，耐光漂白，不會(huì)隨著時(shí)間的推移而損失性能。它們還表現(xiàn)出較少的交叉激光激發(fā)，不會(huì)像串聯(lián)染料一樣只受主體染料激發(fā)。此外，它們可以固定在多聚甲醛中，熒光幾乎沒(méi)有下降。
表1.批間重現(xiàn)性
| 批次 | 染色指數(shù) | 靶細(xì)胞群 |
| SBV515-1 | 213.5 210.0 203.4 | 72.9% 70.7% 70.7% |
| SBV515-2 | 253.2 245.1 258.5 | 72.8% 72.7% 72.1% |
| SBV515-3 | 222.4 204.8 193.6 | 71.9% 70.5% 69.8% |
| 平均值 | 222.7 | 71.6% |
| 偏差 | 23.71 | 0.01 |
 | 圖4. 星光染料的批間重現(xiàn)性。用三批CD4? SBV515（MCA1267SBV515）對(duì)人外周血進(jìn)行 染色，以評(píng)估染色指數(shù)的差異和各批CD4陽(yáng)性 率。表中所示的重疊（實(shí)線）、實(shí)際染色指數(shù) 和陽(yáng)性百分比數(shù)據(jù)的變化都是最小。 |
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