Enzo Life Sciences成立于1976年,總部設(shè)于美國(guó)紐約,在研發(fā)、生產(chǎn)、銷售生物研究試劑方面擁有40多年的成功經(jīng)驗(yàn),涉及靶標(biāo)鑒定及驗(yàn)證、高通量分析、基因表達(dá)分析、蛋白質(zhì)檢測(cè)及細(xì)胞分析等相關(guān)領(lǐng)域,可提供蛋白、抗體、多肽、小分子、標(biāo)簽探針染料及試劑盒等一萬(wàn)余種產(chǎn)品。
Enzo提供的ProteoStat?熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):ENZ-51027)包含檢測(cè)蛋白質(zhì)聚集的熒光染料,因此該產(chǎn)品可用于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)熱應(yīng)力條件下的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。從熱轉(zhuǎn)移試驗(yàn)中,可以容易地確定大部分蛋白質(zhì)聚集的溫度。聚集溫度是蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的指標(biāo),可用于優(yōu)化使蛋白質(zhì)聚集最小化的條件,以及鑒定結(jié)合感興趣蛋白質(zhì)并賦予其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的配體。該試劑盒可直接用于監(jiān)測(cè)熱誘導(dǎo)蛋白變性引起的蛋白聚集,不會(huì)檢測(cè)蛋白非折疊而暴露的疏水部分。該試劑盒也可用于檢測(cè)蛋白緩沖液中其他添加成分對(duì)蛋白穩(wěn)定性的影響,以及在特定條件下多少溫度時(shí)蛋白質(zhì)會(huì)聚集。
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產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
ENZ-51027-K400 | PROTEOSTAT??Thermal shift stability assay kit | 1*400tests |
ENZ-51027-K100 | PROTEOSTAT??Thermal shift stability assay kit | 1*100tests |
產(chǎn)品特點(diǎn):
● 是一種不需要樣品分離或稀釋的簡(jiǎn)單、靈敏、穩(wěn)定的熒光分析方法;
●?能夠加速優(yōu)化蛋白質(zhì)穩(wěn)定性條件;
●?即使事先不知道蛋白質(zhì)的功能或配體結(jié)合位點(diǎn),也可以檢測(cè)配體結(jié)合;
●?在較寬的溫度、pH值和離子強(qiáng)度范圍內(nèi)工作,并與常用緩沖劑和賦形劑兼容;
●?為儀器密集型技術(shù)的交叉驗(yàn)證提供了一種便捷、互補(bǔ)的正交方法。
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如圖所示,PROTEOSTAT?熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):ENZ-51027)檢測(cè)山羊抗小鼠IgG(11.2 mg/ml, pH 7.4)的典型結(jié)果。使用RT-PCR儀器,以3℃/min的速率將溫度從30℃升高到99℃,同時(shí)連續(xù)讀取熒光。藍(lán)線表示原始熒光數(shù)據(jù),紅線表示相應(yīng)的一階導(dǎo)數(shù)軌跡,突出顯示了熒光強(qiáng)度曲線的斜率。一階導(dǎo)數(shù)圖提供了蛋白質(zhì)的聚集溫度(Tagg:最大斜率點(diǎn))。
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蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的配體穩(wěn)定:
如圖所示,將碳酸酐酶I(1μM)與0-62.5 mM的TFMSA(三氟甲烷磺酰胺)在25 mM MES、50 mM NaCl、pH 6.1中孵育。PROTEOSTAT?熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果表明,配體結(jié)合會(huì)增加蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性,其增加量與配體濃度成比例。
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蛋白質(zhì)在不同緩沖液中的穩(wěn)定性:
如圖所示,在150 mM NaCl存在下,將β-乳球蛋白稀釋到不同pH的50 mM緩沖液中,并使用PROTEOSTAT?染料測(cè)定聚集溫度。
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PROTEOSTAT熱轉(zhuǎn)移穩(wěn)定性檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):ENZ-51027)引用文獻(xiàn):
Antibody |
SAMPLE | REFERENCE | LINK |
ADCETRIS | F. Lhospice, et al. (2015) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25625323 |
Antibody-drug conjugates (ADC) | F. Lhospice, et al. (2015) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25625323 |
Anti-PA biligand (Bi-LPA) | M.B. Coppock, et al. (2017) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27539157 |
Anti-PA monoclonal antibody | M.B. Coppock, et al. (2017) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27539157 |
(Fab') | C. Roque, et al. (2015) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25548945 |
IgG | A.D. McConnell, et al. (2013) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23173178 |
IgG | A.D. McConnell, et al. (2016) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25517312 |
IgG | S. Murakami, et al. (2019) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30679500 |
Monoclonal antibodies | A. Teplyakov, et al. (2018) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29283291 |
PEGylated (Fab') | C. Roque, et al. (2015) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25548945 |
Trastuzumab | S. Murakami, et al. (2019) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30679500 |
Other proteins |
SAMPLE | REFERENCE | LINK |
Dihydrofolate reductase variants | S. Bershtein, et al. (2013) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23219534 |
Endoglucanase I (EGI) proteins | G. Bayram Akcapinar, et al. (2015) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25784767 |
Hemagglutinin | K.M. Holz, et al. (2014) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25540031 |
Membrane proteins | I. Vandecaetsbeek, et al. (2016) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26695024 |
STING proteins | J. Conlon, et al. (2013) | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23585680 |
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