? 早在1983年，ELISpot就被用于從單細胞水平鑒定抗體的分泌，作為一種高靈敏的檢測方法，ELISpot可成功用于檢測抗體分泌B 細胞的頻率。B細胞分泌多種類型的免疫球蛋白，同時也分泌抗原特異性免疫球蛋白，可用ELISpot來計數(shù)抗體分泌B細胞。通常將抗原特異性B細胞的數(shù)量與總抗體分泌B細胞進行對比。在接觸抗原（如疫苗接種）的6-9天后B細胞就能分泌抗原特異性抗體。往往經(jīng)多克隆刺激后，才有可能檢測到記憶B細胞的抗體分泌。
? ? ? ??有2種方式來檢測抗原特異性B細胞：用抗原（A）或特異的抗免疫球蛋白抗體（B）包被PVDF板。利用生物素化的anti-IgG (A)或生物素化的抗原（B）來識別捕獲的抗原特異性抗體。第二種方法僅需要少量的抗原就能產(chǎn)生更多清晰的斑點。使用FluoroSpot試劑盒可以檢測B細胞分泌的多個免疫球蛋白亞型（請參考FluoroSpot熒光免疫斑點實驗）。?
圖1. B細胞ELISpot實驗原理：A（抗原包被）和B（生物素化抗原檢測）顯示2種不同的ELISpot方法檢測抗原特異性B細胞；C為B細胞總IgG的ELISpot檢測 ??? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
? ? ?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
圖2.?使用R848和重組IL-2刺激培養(yǎng)PBMC細胞72h后，洗滌細胞，轉(zhuǎn)移到ELISpot板培養(yǎng)并分析總IgG分泌的B細胞?(50,000??cells/well,?過夜孵育)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
?B細胞ELISpot試劑盒信息
?產(chǎn)品名稱 | ?編號 | ?供應(yīng)商 |
| ?人B細胞ELISpot試劑盒 |
?Human IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3860-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3860-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgE ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3810-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgE ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3810-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgG ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3850-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgG ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3850-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgM ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3840-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Human IgM ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3840-2HW-Plus | ?Mabtech |
?猴B細胞ELISpot試劑盒 |
?Monkey IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3860M-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Monkey IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3860M-2HW-Plus | ?Mabtech |
?小鼠B細胞ELISpot試劑盒 |
?Mouse IgA ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3835-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgA ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3835-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgG ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3825-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgG ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3825-2HW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgM ELISpotPlus?kit (ALP) ,with 4 plates | ?3845-2AW-Plus | ?Mabtech |
?Mouse IgM ELISpotPlus?kit (HRP) ,with 4 plates | ?3845-2HW-Plus |
?Mabtech |