駝科，如羊駝和美洲駝，會產(chǎn)生一類獨特的僅由重鏈組成的抗體。而抗原結合片段(Fab)，也稱為僅可變重鏈片段抗體(Variable Heavy-Chain only fragment antibodies，VHH片段)，或納米抗體，是一種新型抗體形式。憑借其15 kDa的小尺寸和出色的特異性和穿透性，VHH為高質(zhì)量和高分辨率成像提供了一個極好的解決方案。Jackson ImmunoResearch 開發(fā)的納米二抗（Nano Secondaries）是一種專門的檢測試劑，利用VHH片段的獨特特性來獲得更好的檢測結果。
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圖1.常規(guī)IgG與VHH的比較，駝科動物如羊駝只產(chǎn)生重鏈IgG。IgG2和3的抗原結合結構域(Fab片段)不包含重鏈的CH1結構域，并且輕鏈也不存在。
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Jackson ImmunoResearch納米二抗是羊駝產(chǎn)生的多克隆VHH片段抗體(納米抗體)。它們對人、兔或小鼠具有特異性。小于15kDa的VHH片段抗體比傳統(tǒng)的全IgG抗體小10倍，非常適合需要良好穿透性的成像實驗。納米二抗經(jīng)過交叉吸附處理，對目標物種具有高度特異性，與其他常用物種的交叉反應性極低，使其適用于多種標記實驗。它們可與報告酶和一系列熒光染料結合，包括Alexa Fluor，為高分辨率免疫組織化學和免疫熒光提供了選擇。
納米二抗的優(yōu)勢：
1、小尺寸可以獲得更高分辨率的圖像
納米抗體的大小是常規(guī)抗體的幾分之一，很容易被用作共聚焦和高分辨率成像的工具，納米抗體直徑小，是用于間接標記的常規(guī)抗體復合物大小的五分之一(24-30nm)，減少了探針和抗原之間的距離，允許捕捉更高分辨率的圖像。
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圖2.用納米二抗染細胞突出亞細胞成像的滋養(yǎng)層染色。（Cytokeratin 8 (blue) (DyLight? 405 VHH Fragment Anti-Rabbit (611-474-215)), vinculin (green) (Alexa Fluor? 488 VHH Fragment Anti-Mouse(615-544-214)), and phalloidin (F-actin) (red). Cytokeratin is an intermediate filament and vinculin is a type of focal adhesion. Both images were blocked with 10% Alpaca serum (028-000-001).）
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2、多克隆保證可靠和優(yōu)越的信號
多克隆對于表達量不高的靶標也能通過放大信號保證高靈敏度。多克隆抗體提供了一種異質(zhì)的抗體群體，每種抗體都有不同的抗原決定簇來檢測一抗的不同部分。多克隆納米二抗可以通過結合整個一抗，而不是有限的特定位點/區(qū)域/序列，從而保證多克隆納米二抗可以大量結合，實現(xiàn)更高的標記效率和更亮的信號。
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圖3.示意圖顯示了與單克隆納米抗體相比，多克隆納米二抗能夠結合更多的一抗的綴合物。
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3、卓越的穿透力和清除能力
納米抗體由于其較小的尺寸而表現(xiàn)出優(yōu)異的組織穿透性，并且由于其擴散系數(shù)低于常規(guī)抗體，這使其能夠在組織中自由移動。缺乏可結晶片段(Fc)進一步提高了該分子從組織中的清除能力，使其成為免疫PET等診斷成像技術的優(yōu)秀工具。
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圖4.利用納米二抗進行formalin固定石蠟包埋(FFPE)小鼠腦中酪氨酸羥化酶的免疫組化染色結果。
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4、適用于死細胞或活細胞樣本染色
具有Fc片段的常規(guī)免疫球蛋白通常僅適用于固定樣品的染色，因為活細胞的受體會通過Fc片段結合影響生物功能。所以缺少Fc片段的納米抗體可用于活細胞的免疫染色。
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5、交叉吸附保證獲得更好的特異性和更低的背景
Jackson ImmunoResearch納米二抗VHH抗體會與常間物種進行交叉吸附處理，以降低背景并增強特異性。
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6、適用于多種熒光染料
Jackson ImmunoResearch納米二抗可與從紫外到遠紅外的廣譜范圍的熒光染料結合，使研究人員在進行實驗時，尤其是識別多種靶蛋白時，具有最大的靈活性。
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圖5. 利用納米二抗進行多重標記染色。（Lung tissue stained for E-cadherin (epithelial cells) (green) (AF488 VHH Alpaca Anti-Rabbit (611-544-215)) and Alpha-smooth muscle actin (magenta) (AF647 VHH Alpaca Anti-Mouse 615-604-214).）
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